Teknologi Analisis miRNA: Revolusi dalam Penelitian Biologi Molekuler

Analisis Sel Tunggal dengan teknik PCR digital (dPCR)

MicroRNA (miRNA) adalah jenis RNA kecil yang terdiri dari 18-25 nukleotida. Meskipun tidak mengkode protein, miRNA memiliki peran penting dalam mengatur ekspresi gen. Dengan sifat konservatif antarspesies serta spesifisitas temporal dan spasial yang unik, miRNA telah terbukti memainkan peran signifikan dalam proses fisiologis, seperti perkembangan embrio, diferensiasi jaringan, metabolisme sel, jalur sinyal, serta perkembangan dan munculnya penyakit.

Penelitian tentang miRNA

Penelitian tentang miRNA dibagi menjadi dua kategori utama:

Studi Non-Fungsional: Fokus pada biosintesis miRNA, proses pematangan, serta asal- usul dan evolusinya.
Studi Fungsional: Mempelajari jalur regulasi biologis yang melibatkan miRNA dan dampaknya terhadap organisme.

Dalam praktiknya, penelitian fungsional miRNA sering mengikuti alur berikut:

Menentukan ekspresi miRNA.
Menemukan hubungan target miRNA.
Mengonfirmasi hubungan target.
Menentukan fungsi biologis.

Metode dan Teknologi

Penelitian miRNA menggunakan berbagai teknik, termasuk:

Prediksi Bioinformatika: Untuk menemukan miRNA yang memiliki potensi biologis tertentu.
Deteksi Jalur Sinyal: Menggunakan metode seperti RT-qPCR, Western blot, dan ELISA untuk mengungkapkan jalur regulasi.
Deteksi In Vivo: Menggunakan teknik seperti luciferase ganda untuk mengonfirmasi hubungan biologis secara langsung.
Analisis Ekspresi: Northern blot dan Real-time PCR untuk mengevaluasi tingkat ekspresi miRNA.

Produk dan Solusi untuk Penelitian miRNA

TIANGEN menyediakan solusi lengkap untuk penelitian miRNA, mencakup:

miRcute miRNA Isolation Kits: Kit ini dirancang untuk mengekstraksi miRNA dari berbagai jenis sampel, termasuk sel, jaringan hewan, jaringan tumbuhan, serum, plasma, dan sampel FFPE (Formalin-Fixed Paraffin-Embedded). Prosedur yang disediakan oleh kit ini memastikan kemurnian dan kualitas miRNA yang tinggi, yang sangat penting untuk analisis downstream.
miRcute Plus miRNA First-Strand cDNA Kit: Kit ini memungkinkan sintesis cDNA untai pertama yang efisien dan akurat dari miRNA. Dengan menggunakan enzim reverse transcriptase berkualitas tinggi dan buffer yang dioptimalkan, kit ini meminimalkan pembentukan struktur sekunder RNA, memastikan hasil transkripsi yang optimal.
miRcute Plus miRNA qPCR Kit (SYBR Green): Kit ini dirancang untuk deteksi kuantitatif miRNA menggunakan metode qPCR berbasis SYBR Green. Dengan sensitivitas tinggi dan spesifisitas yang baik, kit ini memungkinkan deteksi akurat bahkan pada jumlah miRNA yang sangat rendah. Kombinasi dengan primer forward miRNA yang dirancang khusus membuat proses deteksi menjadi lebih cepat dan andal.

Pemilihan Primer Forward miRNA

Pemilihan primer forward miRNA merupakan langkah penting untuk memastikan spesifisitas dan efisiensi dalam deteksi kuantitatif. Beberapa pertimbangan utama dalam memilih primer ini meliputi:

Desain Spesifik untuk miRNA Target: Primer harus dirancang untuk melengkapi urutan spesifik miRNA target dengan akurasi tinggi, menghindari pengikatan nonspecific.
Stabilitas Termal: Primer yang dirancang harus memiliki suhu pelelehan (Tm) yang sesuai untuk meningkatkan efisiensi amplifikasi.
Validasi Eksperimental: Sebelum digunakan secara luas, primer perlu diuji dan divalidasi untuk memastikan kompatibilitas dengan kit dan metode deteksi yang digunakan.
Kombinasi dengan cDNA Kit: Primer forward miRNA dirancang untuk bekerja optimal dengan cDNA yang dihasilkan oleh miRcute Plus miRNA First-Strand cDNA Kit, memastikan hasil amplifikasi yang konsisten.

Produk TIANGEN menyediakan primer forward miRNA yang telah dioptimalkan, memungkinkan deteksi miRNA dengan sensitivitas tinggi dan efisiensi maksimal.

Temukan banyak produknya disini.

Penulis: Sylvia Sance Marantina, M.Biomed

PT Sciencewerke
Making Science Work For You

Telp : 021 536 67591
Email : [email protected]
WhatsApp : 0858 8880 0005
Website : www.sciencewerke.com
Alamat : Jl. Palmerah Barat No. 25, Palmerah, Jakarta Barat 11480

Back

Promotions